Необходимо решить задачу:
Ниже приведены последовательности двух фрагментов ДНК, выделенных из организмов разных видов.
5`-АААГЦТТЦТГААТЦЦГАТЦГ-3`
3`-ТТТЦГААГАЦТТАГГЦТАГЦ-5`
5`-ГТАЦТЦАГАТЦЦТАГГАТААГЦТТА-3`
3`-ЦАТГАГТЦТАГГАТЦЦТАТТЦГААТ-5`
С помощью каких ферментов можно получить гибридную молекулу ДНК из этих фрагментов? Опишите последовательные этапы получения гибридной молекулы.
ПРИМЕР РЕШЕНИЯ
Задача №4. Ниже приведены последовательности двух фрагментов ДНК, выделенных из организмов разных видов.
1) 5`-АГЦАТАЦТГТГААТТЦАЦА-3`
3`-ТЦГТАТГАЦАЦТТААГТГТ-5`
2) 5`-АТГААТТЦТТАГЦАТАЦ-3`
3`-ТАЦТТААГААТЦГТАТГ-5`
С помощью каких ферментов можно получить гибридную молекулу ДНК из этих фрагментов? Опишите последовательные этапы получения гибридной молекулы.
Решение:
На первом этапе необходимо разрезать представленные фрагменты ДНК разных видов с помощью подходящих рестрикционных ферментов. В данном случае можно использовать рестриктазу EcoRI, которая расщепит ДНК двух видов на четыре новых фрагмента 1а, 1б и 2а, 2б с липкими концами ААТТ и ТТАА:
1а) 5`-АГЦАТАЦТГТГ 1б) ААТТЦАЦА-3`
3`-ТЦГТАТГАЦАЦТТАА ГТГТ-5`
2а) 5`-АТГ 2б) ААТТЦТТАГЦАТАЦ-3`
3`-ТАЦТТАА ГААТЦГТАТГ-5`
В ходе второго этапа необходимо смешать нужные нам фрагменты 1а и 2б. В результате выступающие липкие концы скрепятся между собой, как им и положено, водородными связями в силу комплементарности.
5`-АГЦАТАЦТГТГ А-А-Т-Т-ЦТТАГЦАТАЦ-3`
3`-ТЦГТАТГАЦАЦ-Т-Т-А-А ГААТЦГТАТГ-5`
Окончательное скрепление фрагментов 1а и 2б двух молекул ДНК производит специализированный фермент ДНК-лигаза, которая «сшивает» между собой сахарофосфатные остовы обоих фрагментов с образованием полной структуры двойной спирали ДНК.
Во вложении таблица с ферментами для первого этапа задачи.
Земфира
ФГБОУ ВО «Нижневартовский государственный университет»
Обращаюсь не впервые, очень ответственный исполнитель!? делает работу на высшем уровне и...
Глеб
РГСУ
Умница, сделала раньше поставленного срока, выполнено идеально, обращайтесь к ней за помощью!
Яна
РУДН
Самый лучший автор, какого-либо я встречала.. но такого не встречала никогда. Спасибо огро...
Наталия
МПГУ
Большое спасибо Вам, Ирина, за столь грамотную и кропотливую работу! Вы меня очень выручили!)